二硫鍵成環技術
蛋(dan)白(bai)質和(he)多肽類藥物的(de)研究和(he)發展(zhan)已(yi)經成(cheng)為生物醫(yi)藥領域(yu)研究的(de)一(yi)個熱點(dian)。二(er)硫鍵在維(wei)持(chi)多肽和(he)蛋(dan)白(bai)質的(de)空間(jian)立體結(jie)構(gou)及由(you)此決(jue)定的(de)生物活(huo)性中發揮著重要的(de)作(zuo)用(yong)。我(wo)(wo)(wo)們(men)在多肽領域(yu)內長期深入的(de)研究，讓我(wo)(wo)(wo)們(men)積累了大量(liang)(liang)的(de)寶貴經驗，我(wo)(wo)(wo)們(men)已(yi)經成(cheng)功給(gei)客戶交付了大量(liang)(liang)的(de)包括一(yi)對和(he)兩對以上二(er)硫鍵成(cheng)環的(de)多肽，并保持(chi)了我(wo)(wo)(wo)們(men)高成(cheng)功率，高質量(liang)(liang)的(de)特色(se)。
二硫鍵即為蛋白質或多肽分子中兩個不同位點Cys的巰基（-SH）被氧化形成的S-S共價鍵。一條肽鏈上不同位置的氨基酸之間形成的二硫鍵，可以將肽鏈折疊成特定的空間結構。多肽分子通常分子量較大，空間結構復雜，結構中形成二硫鍵時要求兩個半胱氨酸在空間距離上接近。此外，多肽結構中還原態的巰基化學性質活潑，容易發生其他的副反應，而且肽鏈上其他側鏈也可能會發生一系列修飾，因此，肽鏈進行修飾所選取的氧化劑和氧化條件是反應的關鍵因素，反應機理也比較復雜，既可能是自由基反應，也可能是離子反應。
反應條件有多種選擇，比如空氣氧化，DMSO氧化等溫和的氧化過程，也可以采用H2O2，I2，汞鹽等激烈的反應條件。
空氣氧化法：
空氣氧化法形成二(er)硫鍵是多(duo)肽(tai)合成中(zhong)最(zui)經典(dian)的(de)方法，通常(chang)是將巰(qiu)基處(chu)于(yu)還原(yuan)態的(de)多(duo)肽(tai)溶于(yu)水(shui)中(zhong)，在近中(zhong)性(xing)或弱堿性(xing)條件下（PH值6.5-10），反應(ying)24小時以上(shang)。為了降低分(fen)子之間二(er)硫鍵形成的(de)可能，該方法通常(chang)需要(yao)在低濃度條件下進(jin)行。
碘氧化法：
將多肽溶于25%的(de)甲醇水溶液或30%的(de)醋酸水溶液中，逐滴滴加(jia)(jia)10-15mol/L的(de)碘(dian)進行(xing)氧化(hua)，反應(ying)15-40min。當肽鏈中含(han)有對碘(dian)比較敏感的(de)Tyr、Trp、Met和His的(de)殘基時，氧化(hua)條件要控制的(de)更精確，氧化(hua)完后，立(li)即加(jia)(jia)入維生素C或硫代(dai)硫酸鈉(na)除去過(guo)量的(de)碘(dian)。
當序列中有兩對或多對二硫鍵需要成環時，通常有兩種情況：
自然隨機成環:
序列中的Cys之間隨機成環，與一對二硫鍵成環條(tiao)件(jian)相似(si)；
定點成環：
定點成環即序列中的Cys按照設計要求形成二硫鍵，反應過程相對復雜。在固相合成多肽之前，需要提前設計幾對二硫鍵形成的順序和方法路線，選擇不同的側鏈巰基保護基，利用其性質差異，分步氧化形成兩對或多對二硫鍵。通常采用的巰基保護基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多種基團。
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