抗體應用簡介
ELISA的實驗原理是基于抗體/抗原的特異性結合，它不僅能夠對特定的蛋白進行定量分析，還可以研究分子之間的相互作用或其他特性。
將針對(dui)靶標的抗體(ti)與檢(jian)測(ce)酶偶聯。在加入底物(wu)時，這種(zhong)酶催化底物(wu)生成有色(se)產物(wu)。通過分光光度(du)計(ji)的測(ce)定，便(bian)可以知道樣品(pin)中抗原(yuan)的濃度(du)。
WB通常被用來確定樣品間蛋白的相對表達水平，還可以確定目標蛋白的分子量大小，這有利于我們對蛋白的翻譯后修飾過程進行研究。
根(gen)據分(fen)子量大小的(de)不同(tong)，組織或細胞裂解液中的(de)蛋(dan)白通過凝(ning)膠電泳得以分(fen)離。接著，分(fen)離的(de)蛋(dan)白被(bei)轉移(yi)到(dao)膜上，隨后用抗體來檢測感興趣的(de)蛋(dan)白。
IHC揭示了樣本內抗原的組織特異性和亞細胞定位。相比與WB和ELISA，它的定量分析應用較少，但是在完整組織中對于蛋白表達的分析更有優勢 。
IHC染(ran)色是通過抗體(ti)(ti)識別(bie)靶(ba)蛋白(bai)實(shi)現的。抗原(yuan)抗體(ti)(ti)復合(he)物能夠通過酶促(cu)反應(ying)或(huo)者熒光來實(shi)現可視化。這些底物可以直接偶聯到一抗或(huo)二抗上。
ICC通常使用熒光標記的抗體來研究蛋白的亞細胞分布。與IHC相比，該技術提供了更高的空間分辨率，因為培養的細胞不會有組織樣本的復雜環境。
在已經固定(ding)并通透處(chu)理的(de)細(xi)胞培養樣本(ben)中(zhong)，抗(kang)體和靶蛋白特異(yi)性結合，再通過與一抗(kang)直接(jie)偶聯(lian)的(de)熒(ying)光素或熒(ying)光二抗(kang)，使其可視(shi)化。用熒(ying)光顯(xian)微鏡即可對結果信號(hao)進行觀察(cha)。多個靶標(biao)可以使用不同熒(ying)光標(biao)記的(de)一抗(kang)同時(shi)進行研(yan)究。
流式細胞術是測量細胞某些化學和物理特性的一種手段。參數測量包括細胞大小和細胞表面以及細胞內標記物的表達量。
流(liu)式細(xi)胞(bao)儀測量(liang)被標記抗體(ti)的(de)熒(ying)(ying)光。細(xi)胞(bao)分(fen)選（FACS）是一種更復(fu)雜(za)的(de)系(xi)統，它能量(liang)化熒(ying)(ying)光信號(hao)，并將細(xi)胞(bao)以預先(xian)選定的(de)特征（如熒(ying)(ying)光強(qiang)度、大小(xiao)和生(sheng)存能力），從混(hun)合細(xi)胞(bao)群中分(fen)離出來。
免疫沉淀是分離純化單一或復合蛋白的最常用的一種方式。抗體被固定在固相基質（如磁珠/瓊脂糖小球）上，從而從復雜溶液中捕獲抗原。
染色質免(mian)疫沉淀(ChIP) 技術用(yong)來確(que)定特(te)定蛋白是(shi)否與體內特(te)定DNA序列相(xiang)互(hu)作用(yong)。
ELISPOT用于檢測如細胞因子和生長因子這樣的分泌蛋白。該技術可以量化和對比各種刺激下的免疫反應。
在96孔(kong)板中，細(xi)胞生(sheng)長在帶有抗(kang)體包被的(de)(de)PVDF膜或硝化(hua)纖(xian)維素膜上，分泌蛋(dan)白(bai)會與(yu)抗(kang)體結合。抗(kang)體-抗(kang)原間的(de)(de)相互作用可以(yi)通過二抗(kang)進行(xing)檢測，使(shi)得分泌蛋(dan)白(bai)的(de)(de)親本細(xi)胞呈現特定(ding)的(de)(de)顏色(se)（一個點=1個細(xi)胞）。對膜進行(xing)掃描和分析，以(yi)定(ding)量(liang)分泌蛋(dan)白(bai)的(de)(de)細(xi)胞的(de)(de)數量(liang)/百分比。
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